Busitalia opera cinque tratte tra sei porti in Italia, soprattutto Passignano sul Trasimeno, Tuoro sul Trasimeno e Castiglione del Lago. Dal porto di Passignano sul Trasimeno: Tuoro sul Trasimeno, Castiglione del Lago, Isola Maggiore e San Feliciano. Dal porto di Castiglione del Lago: Isola Maggiore. Dal porto di San Feliciano: Isola Polvese.